آزمایش های تب مالت | بروسلوز | Brucellosis | تست رایت (Wright) | تست کومبس رایت (Coombs Wright) | آزمایش 2ME

دکتر فرزاد باباخانی
آخرین بروزرسانی
22 آبان 1402
آخرین بروزرسانی
22 آبان 1402
آزمایش های تب مالت | بروسلوز | Brucellosis | تست رایت (Wright) | تست کومبس رایت (Coombs Wright) | آزمایش 2ME

تب مالت (بروسلوز) یک عفونت باکتریایی است که توسط گونه های مختلف از جنس بروسلا ایجاد می شود. این بیماری زئونوز (مشترک میان انسان و دام) در درجه اول حیوانات را تحت تاثیر قرار می دهد اما می تواند از طریق تماس با حیوانات آلوده، مصرف محصولات حیوانی آلوده یا استنشاق ذرات معلق در هوا به انسان منتقل شود. بروسلوز با نام های دیگری مانند “تب موج دار” یا “بیماری بانگ” نیز شناخته می شود.

چرا آزمایش تب مالت (بروسلوز) درخواست می شود؟

تست تب مالت (بروسلوز)، برای چندین هدف مهم در عمل بالینی و بهداشت عمومی درخواست می شود:

  • تشخیص تب مالت (بروسلوز): دلیل اولیه درخواست آزمایش تب مالت (بروسلوز)، تشخیص موارد مشکوک بروسلوز در افرادی است که با علائمی مطابق با بیماری مراجعه می کنند. این علائم می تواند شامل تب، لرز، تعریق، خستگی، درد مفاصل و دردهای عضلانی باشد. از آنجایی که این علائم می توانند با سایر بیماری ها همپوشانی داشته باشند، آزمایش برای تایید وجود تب مالت (بروسلوز) بسیار مهم است.
  • نظارت بر پیشرفت بیماری: برای افراد مبتلا به تب مالت (بروسلوز) تایید شده، آزمایش سریالی آنتی بادی های بروسلا می تواند به مانیتور پیشرفت بیماری و اثربخشی درمان کمک کند. تغییر قابل توجهی در تیتر آنتی بادی در طول زمان می تواند نشان دهنده سیر عفونت باشد.
  • ردیابی تماس: در مواردی که یک فرد مبتلا به تب مالت (بروسلوز) تشخیص داده می شود، شناسایی و آزمایش افرادی که ممکن است با فرد آلوده تماس نزدیک داشته باشند، مهم است، به خصوص اگر منبع تماس مشترکی داشته باشند، مانند مصرف غیر پاستوریزه. محصولات لبنی یا کار با حیوانات آلوده. این به جلوگیری از گسترش بیشتر بیماری کمک می کند.
  • غربالگری بهداشت حرفه ای: افرادی که در برخی مشاغل پرخطر هستند، مانند کشاورزان، دامپزشکان، و کارگرانی که با حیوانات یا مواد بالقوه آلوده کار می کنند، ممکن است به عنوان بخشی از نظارت بهداشت شغلی تحت آزمایش تب مالت (بروسلوز) منظم قرار گیرند. این کار برای تشخیص زودهنگام عفونت ها و محافظت از سلامت کارگران انجام می شود.
  • مسافرت و تجارت بین المللی: در مناطقی که تب مالت (بروسلوز) شیوع دارد، ممکن است از افرادی که به خارج از کشور سفر می کنند خواسته شود که مدرک واکسیناسیون یا نتایج آزمایش منفی بروسلوز را نشان دهند، به خصوص اگر در طول سفر با حیوانات یا محصولات حیوانی کار کنند. .
  • تحقیق و اپیدمیولوژی: آزمایش تب مالت (بروسلوز) نیز در محیط های تحقیقاتی برای مطالعه شیوع و توزیع بیماری و توسعه استراتژی هایی برای کنترل آن انجام می شود.

چه زمانی آزمایش تب مالت (بروسلوز) بایستی انجام شود؟

آزمایش تب مالت (بروسلوز) باید زمانی در نظر گرفته شود که افراد با علائم خاصی مراجعه می کنند و عوامل خطر مرتبط با بیماری را دارند. زمان انجام آزمایش ممکن است بسته به وضعیت بالینی متفاوت باشد. در اینجا علائم و موقعیت های کلیدی که آزمایش تب مالت (بروسلوز) را ضروری می کند آورده شده است:

  • تب: تب بی دلیل از علائم شایع تب مالت (بروسلوز) است. ممکن است متناوب یا مداوم باشد.
  •  لرز و تعریق: افراد مبتلا به تب مالت (بروسلوز) اغلب دوره‌هایی از لرز را تجربه می‌کنند که با تعریق زیاد همراه است.
  • خستگی: خستگی و ضعف شدید می تواند همراه با تب مالت باشد.
  • درد عضلانی و مفاصل: درد در عضلات و مفاصل، شبیه به علائم آنفولانزا، ممکن است رخ دهد.
  • سردرد: سردردهای مکرر ممکن است از علائم تب مالت (بروسلوز) باشد.
  • بزرگ شدن طحال و کبد: در برخی موارد ممکن است طحال و کبد بزرگ شوند.
  • علائم گوارشی: تهوع، استفراغ، اسهال و درد شکم ممکن است رخ دهد اما کمتر شایع است.
  • علائم عصبی: در موارد شدید تب مالت می تواند منجر به علائم عصبی مانند گیجی، افسردگی و در موارد نادر تشنج شود.
  • مواجهه شغلی: افرادی که مشاغل پرخطر دارند، مانند کشاورزان، دامپزشکان و کارگرانی که با حیوانات یا محصولات حیوانی کار می کنند، بیشتر در معرض خطر ابتلا به تب مالت هستند.
  • مصرف فرآورده های لبنی خام آلوده: نوشیدن شیر غیر پاستوریزه یا مصرف لبنیات تهیه شده از شیر غیرپاستوریزه حیوانات آلوده یک عامل خطر مهم است.
  • سفر به مناطق آندمیک: سفر به مناطقی که بروسلوز در آنها شایع است، به خصوص اگر تماس با حیوانات یا محصولات حیوانی وجود داشته باشد، خطر را افزایش می دهد.
  • تماس نزدیک با حیوانات آلوده: تماس با حیوانات مبتلا به تب مالت یا دست زدن به مواد آلوده به مایعات بدنشان، مانند بافت جفت در هنگام تولد یا سقط جنین، خطری را به همراه دارد.
  •  قرار گرفتن در معرض استنشاق: افرادی که در محیط هایی کار می کنند که در آن آئروسل های آلوده به بروسلا تولید می شود، مانند کشتارگاه ها یا آزمایشگاه ها، در معرض خطر استنشاق باکتری هستند.

نمونه مورد نیاز برای آزمایش تب مالت (بروسلوز):

  • ظرف/لوله: لوله با درب زرد یا قرمز (ترجیحا حاوی ژل جدا کننده) برای بررسی آنتی بادی / لوله استریل درب پیچ دار برای مایعات مختلف/ ظرف ادرار / ظرف کشت خون برای نمونه خون و مغز استخوان
  • نوع نمونه: سرم / خون کامل / مغز استخوان / مایع مغزی نخاعی (CSF) / مایع مفصلی / بیوپسی بافتی
  • حجم نمونه: حداقل یک میلی لیتر برای تست سرولوژی و تست های مولکولی / 10 میلی لیتر برای آزمایش کشت خون
ظروف نمونه مورد نیاز برای آزمایش تب مالت

ظروف نمونه مورد نیاز برای آزمایش تب مالت

رایط نگهداری دمایی برای آزمایش تب مالت (بروسلوز)

روش های مختلف جمع آوری نمونه های آزمایشگاه

روش های مختلف جمع آوری نمونه های آزمایشگاه

لوله های آزمایش و ضد انعقادها (Test tubes and Anticoagulants)

لوله های آزمایش و ضد انعقادها (Test tubes and Anticoagulants)

ذخیره سازی نمونه های آزمایشگاهی

ذخیره سازی نمونه های آزمایشگاهی

آمادگی قبل از انجام آزمایش تب مالت (بروسلوز):

به آمادگی خاصی مانند ناشتایی نیاز ندارد. فقط اگز داروی خاص یا آنتی بیوتیک مصرف می کنید حتما به پزشک یا همکاران آزمایشگاه اطلاع دهید تا دستورالعمل لازم را به شما شرح دهند.

روش های مختلف آزمایشگاهی برای انجام آزمایشتب مالت (بروسلوز):

روش ارزیابی بالینی:

ارزیابی بالینی برای تشخیص تب مالت (بروسلوز) شامل ارزیابی جامع سابقه پزشکی بیمار، معاینه فیزیکی و ارزیابی علائم و عوامل خطر است. در حالی که ارزیابی بالینی به تنهایی برای تشخیص قطعی بروسلوز کافی نیست، اما نقش مهمی در شناسایی بیمارانی که ممکن است در معرض خطر باشند و هدایت آزمایش‌های تشخیصی و درمان بیشتر دارد. در اینجا شرح مفصلی از فرآیند ارزیابی بالینی آمده است:

سابقه پزشکی: پزشک معالج با گرفتن شرح حال دقیق پزشکی از بیمار شروع می کند. این شامل سؤال در مورد علائم فعلی بیمار، مدت زمان آنها و هرگونه نوسان در علائم در طول زمان است. پزشک در مورد هرگونه مواجهه اخیر و فعالیت هایی که می تواند با تب مالت (بروسلوز) مرتبط باشد، از جمله موارد زیر سوال می کند:

– تماس با حیوانات: به ویژه اینکه آیا بیمار در تماس نزدیک با دام (گاو، بز، گوسفند، خوک) یا سایر حیوانات شناخته شده ناقل بروسلا بوده است.
– مصرف فرآورده های حیوانی: این که آیا بیمار لبنیات غیر پاستوریزه مصرف کرده باشد یا گوشت نیم پز حیوانات بالقوه آلوده.
– سابقه سفر: هر سفر اخیر به مناطقی که تب مالت بومی یا شایع است.
– سابقه شغلی: پرس و جو در مورد شغل بیمار، به ویژه اگر شامل کار با حیوانات یا در آزمایشگاه های کشت بروسلا باشد.

ارزیابی علائم: پزشک علائم بیمار را ارزیابی می کند. علائم شایع مرتبط با بروسلوز عبارتند از:

– تب: اغلب متناوب و همراه با لرز و تعریق
– درد عضلات و مفاصل
– سردرد
– خستگی
– بزرگ شدن طحال و کبد
– علائم گوارشی (کمتر شایع)
– علائم عصبی (در موارد شدید)

معاینه فیزیکی: یک معاینه فیزیکی کامل برای شناسایی علائم بالینی که ممکن است نشان دهنده تب مالت (بروسلوز) باشد، انجام می شود. یافته های کلیدی ممکن است شامل موارد زیر باشد:

– تب: وجود تب یا بالا رفتن ثابت تب.
– بزرگ شدن طحال یا کبد که در معاینه فیزیکی قابل لمس است.
– علائم درگیری اسکلتی عضلانی، مانند حساسیت یا تورم مفاصل.
– شواهدی از عوارض، مانند عفونت موضعی یا آبسه.

روش‌های سرولوژیکی:

روش‌های سرولوژیکی بخش مهمی در تشخیص تب مالت (بروسلوز) هستند، زیرا آنتی‌بادی‌های تولید شده توسط سیستم ایمنی بیمار در پاسخ به عفونت تب مالت (بروسلوز) را شناسایی می‌کنند. این تست ها نقش بسزایی در تایید وجود تب مالت (بروسلوز) دارند و ابزار ارزشمندی برای تشخیص بیماری هستند. در اینجا شرح مفصلی از چندین روش سرولوژیکی مورد استفاده در تشخیص بروسلوز آورده شده است:

تست رز بنگال (RBT):

این یک آزمایش آگلوتیناسیون سریع است که آنتی بادی علیه بروسلا را در سرم بیمار تشخیص می دهد.

  • روش: یک قطره از سوسپانسیون بروسلا حاوی ذرات آنتی ژن رنگی شده با یک قطره از سرم بیمار روی یک لام شیشه ای مخلوط می شود. اسلاید به آرامی تکان داده می شود و برای آگلوتیناسیون (کلوپه شدن) ذرات آنتی ژن مشاهده می شود. آگلوتیناسیون نشان دهنده وجود آنتی بادی بروسلا است.
  • تفسیر: نتیجه مثبت با آگلوتیناسیون مشخص می شود که به صورت توده های کوچک قابل مشاهده است.
  • مزایا: RBT ساده، سریع و به عنوان یک تست غربالگری مفید است.
تست رزبنگال (RBT)

تست رزبنگال (RBT)

تست رایت (Wright) و کومبز رایت (Coombs Wright):

این تست ها آزمایش های آگلوتیناسیون لوله ای هستند که آنتی بادی های آگلوتینه کننده را علیه بروسلا تشخیص می دهند.

  • تست رایت (Wright): در این آزمایش، میزان آنتی‌بادی‌های تولید شده در بدن در پاسخ به عفونت با باکتری بروسلا اندازه‌گیری می‌شود. باید توجه داشت که اثبات مثبت بودن این تست به تنهایی به معنای ابتلا به بیماری نیست. پزشک برای تفسیر نتایج این آزمایش باید آنها را با علائم بالینی دیگر بیمار متوجه کند.
تست رایت (Wright)

تست رایت (Wright)

  • تست کومبس رایت (Coombs Wright): آنتی‌بادی‌ها در بدن افراد مبتلا به عفونت با باکتری بروسلا تولید می‌شوند. اما باید توجه داشت که این آنتی‌بادی‌ها اغلب از نوع IgG هستند و توانایی آگلوتیناسیون (ترکیب و تشکیل گلوله‌های آنتی‌ژنی) ندارند. به عبارت دیگر، نمی‌توان این آنتی‌بادی‌ها را به کمک آزمایش رایت تشخیص داد. در چنین مواردی از موادی مانند معرف کومبس یا آنتی‌بادی‌های ضد گلوبولین‌های انسانی برای تشخیص آنتی‌بادی‌ها در سرم بیمار استفاده می‌شود.
  • تفسیر: نتیجه مثبت با آگلوتیناسیون قابل مشاهده نشان داده می شود.
  • مزایا: این آزمایش ها نتایج کمی را ارائه می دهند و می توانند به ارزیابی سطح آنتی بادی در سرم بیمار کمک کنند.

آزمایش 2- مرکاپتواتانول (تست 2ME):

این آزمایش اصلاحی از تست‌های آگلوتیناسیون استاندارد مانند تست‌های رایت و کومبز-رایت است و برای تمایز بین آنتی‌بادی‌های IgM و IgG تولید شده در پاسخ به عفونت بروسلا استفاده می‌شود. آنتی بادی های IgM معمولاً با عفونت های حاد مرتبط هستند، در حالی که آنتی بادی های IgG با عفونت های مزمن یا گذشته مرتبط هستند.

تست 2ME بر اساس اصل کاهش افتراقی آنتی بادی ها است. از این واقعیت استفاده می‌کند که آنتی‌بادی‌های IgM نسبت به آنتی‌بادی‌های IgG نسبت به آنتی‌بادی‌های IgG مستعد کاهش با 2ME هستند. با درمان سرم بیمار با 2ME، آنتی بادی های IgM تخریب می شوند، در حالی که آنتی بادی های IgG دست نخورده باقی می مانند. آگلوتیناسیون در حضور 2ME نشان دهنده وجود آنتی بادی های IgG است.

  • روش: بخشی از سرم بیمار با 2ME مخلوط می شود. 2ME آنتی بادی های IgM موجود در سرم را کاهش داده و مختل می کند و باعث می شود که آنها نتوانند با آنتی ژن بروسلا لخته شوند. به طور موازی، سرم بیمار درمان نشده و سرم بیمار تحت درمان با 2ME با سوسپانسیون آنتی ژن بروسلا در لوله های آزمایش جداگانه مخلوط می شوند.  لوله ها در دمای مناسب انکوبه می شوند. پس از انکوباسیون، لوله ها برای آگلوتیناسیون در شرایط نوری مناسب مشاهده می شوند.
  • تفسیر: اگر آگلوتیناسیون در لوله حاوی سرم تیمار شده با 2ME اتفاق بیفتد اما در لوله با سرم درمان نشده رخ دهد، نشان دهنده وجود آنتی بادی های IgG علیه بروسلا است.
  • مزایا: تست 2ME می تواند به تمایز بین عفونت های حاد و مزمن بر اساس نوع آنتی بادی های شناسایی شده کمک کند.

تست تثبیت مکمل (CFT):

CFT یک آزمایش بسیار اختصاصی است که توانایی آنتی بادی های سرم بیمار را برای تثبیت یا مصرف پروتئین های مکمل در حضور آنتی ژن های بروسلا اندازه گیری می کند. تثبیت کمپلمان یک مکانیسم پاسخ ایمنی است و این آزمایش به ویژه برای تایید تشخیص تب مالت (بروسلوز) مفید است.

در CFT برای تب مالت (بروسلوز)، سرم بیمار برای وجود آنتی بادی هایی که می توانند به آنتی ژن های بروسلا متصل شوند، آزمایش می شود. اگر چنین آنتی بادی هایی وجود داشته باشند، به آنتی ژن های بروسلا ارائه شده در آزمایش متصل می شوند که متعاقباً منجر به مصرف پروتئین های مکمل می شود. میزان تثبیت کمپلمان اندازه گیری می شود و نتیجه مثبت نشان دهنده وجود آنتی بادی علیه بروسلا است.

  • روش:
  1. تهیه آنتی ژن: آنتی ژن بروسلا برای آزمایش آماده می شود. این آنتی ژن حاوی اجزای بروسلا است که با آنتی بادی های خاص در سرم بیمار واکنش نشان می دهد.
  2. روال آزمایش: مجموعه ای از لوله های آزمایش برچسب گذاری شده و با رقت های مختلف سرم بیمار تهیه می شود. آنتی ژن بروسلا به هر لوله اضافه می شود، از جمله یک لوله که به عنوان کنترل بدون سرم بیمار عمل می کند. سپس لوله ها انکوبه می شوند تا واکنش های آنتی بادی-آنتی ژن رخ دهد.
  3. افزودن پروتئین های کمپلمان: پس از انکوباسیون، پروتئین های کمپلمان (معمولا کمپلمان خوکچه هندی) به هر لوله اضافه می شود.  تثبیت کمپلمان در لوله هایی که آنتی بادی های خاص به آنتی ژن بروسلا متصل می شوند، رخ می دهد.
  4. سیستم نشانگر: یک سیستم نشانگر، معمولاً به شکل گلبول های قرمز حساس شده گوسفند (همولیزین) معرفی شده است. اگر کمپلمان در حضور آنتی بادی های خاص تثبیت (مصرف) شود، برای لیز (تجزیه) گلبول های قرمز در دسترس نخواهد بود.
  5. مشاهده: لوله ها برای وجود یا عدم وجود همولیز (لیز گلبول های قرمز) پس از افزودن سیستم نشانگر مشاهده می شوند. عدم وجود همولیز در حضور سرم بیمار نشان دهنده تثبیت کمپلمان و نتیجه مثبت CFT است.
تست تثبیت مکمل (CFT)

تست تثبیت مکمل (CFT)

  • تفسیر: نتیجه مثبت در CFT با عدم وجود همولیز در حضور سرم بیمار مشخص می شود. تیتر (سطح رقت) سرمی که در آن تثبیت کمپلمان رخ می دهد می تواند برای ارزیابی قدرت پاسخ آنتی بادی استفاده شود.
  •  مزایا: CFT بسیار اختصاصی است و اغلب به عنوان یک آزمایش تاییدی برای بروسلوز استفاده می شود. نتایج کمی ارائه می دهد و می تواند به ارزیابی سطح آنتی بادی در سرم بیمار کمک کند.

روش سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA):

ELISA بر واکنش آنتی ژن-آنتی بادی متکی است، جایی که آنتی بادی های خاص در سرم بیمار به آنتی ژن های بروسلا که روی یک سطح جامد (معمولاً یک میکروپلیت) تثبیت شده اند، متصل می شوند. سپس از یک آنتی بادی ثانویه کونژوگه با آنزیم برای شناسایی آنتی بادی های متصل استفاده می شود و واکنش تغییر رنگ با افزودن یک سوبسترا آغاز می شود. شدت تغییر رنگ متناسب با مقدار آنتی بادی های موجود است و امکان تجزیه و تحلیل کمی را فراهم می کند.

  • روش:
  1. پوشش با آنتی ژن بروسلا: آنتی ژن های بروسلا (معمولاً مخلوطی از آنتی ژن های مشترک در گونه های مختلف بروسلا) روی چاهک های یک میکروپلیت جذب یا پوشانده می شوند. پلیت انکوبه می شود تا آنتی ژن ها به سطح بچسبند.
  2. مسدود کردن: محل‌های اتصال اشغال نشده روی میکروپلیت با یک بافر مسدودکننده (معمولاً حاوی آلبومین سرم گاوی یا پروتئین‌های شیر) مسدود می‌شوند. این مرحله از اتصال غیر اختصاصی آنتی بادی ها به میکروپلیت جلوگیری می کند.
  3. اضافه نمونه و کنترل: نمونه های سرم بیمار و نمونه های کنترل (کنترل های مثبت و منفی شناخته شده) به چاهک های فردی اضافه می شوند. هر نمونه سرم به یک رقت از پیش تعیین شده، معمولاً در یک سری رقت سریال رقیق می شود.
  4. انکوباسیون: میکروپلیت انکوبه می شود و به آنتی بادی های موجود در سرم اجازه می دهد به طور خاص به آنتی ژن های بی حرکت بروسلا متصل شوند.
  5. شستشو: پلیت شسته می شود تا آنتی بادی های متصل نشده و سایر اجزای سرم حذف شوند.
  6. افزودن آنتی بادی ثانویه: یک آنتی بادی ثانویه مرتبط با آنزیم به هر چاهک اضافه می شود. این آنتی بادی ثانویه به طور خاص آنتی بادی های انسانی را می شناسد و به آن متصل می شود و یک کمپلکس را تشکیل می دهد.
  7. انکوباسیون: میکروپلیت دوباره انکوبه می شود و به آنتی بادی ثانویه اجازه می دهد تا به هر آنتی بادی که در چاهک ها گرفته شده است متصل شود.
  8. شستشو: آنتی بادی ثانویه اضافی شسته می شود.
  9. افزودن سوبسترا: یک سوبسترای کروموژنیک، معمولاً یک بستر بی رنگ که در اثر برهمکنش با آنزیم مرتبط با آنتی بادی ثانویه به یک محصول رنگی تبدیل می شود، به هر چاهک اضافه می شود.
  10. توسعه رنگ: با واکنش سوبسترا با آنزیم، یک محصول رنگی متناسب با مقدار آنتی بادی های متصل در هر چاه ایجاد می شود.
  11. خاتمه واکنش: واکنش توسعه رنگ با افزودن محلول توقف متوقف می شود.
  12. اندازه گیری چگالی نوری (OD): چگالی نوری (جذب) محلول رنگی در هر چاه با استفاده از میکروپلیت خوان در طول موج مشخص (معمولاً 450 نانومتر) اندازه گیری می شود.
  • تفسیر: قرائت OD نمونه های بیمار با نمونه های کنترل مقایسه می شود. نتیجه مثبت با OD بالاتر در نمونه بیمار نسبت به شاهد منفی نشان داده می شود که نشان دهنده وجود آنتی بادی علیه بروسلا است. تجزیه و تحلیل کمی را می توان با مقایسه مقادیر OD بیمار با منحنی استاندارد ایجاد شده با استفاده از نمونه های کنترل مثبت انجام داد. این امکان تعیین تیتر آنتی بادی را فراهم می کند.
  • مزایای: الایزا بسیار حساس و اختصاصی است و آن را به ابزاری عالی برای تشخیص بروسلوز تبدیل می کند. نتایج کمی را ارائه می دهد و امکان ارزیابی سطح آنتی بادی در سرم بیمار را فراهم می کند.

این روش‌های سرولوژیکی، هنگامی که به صورت ترکیبی استفاده می‌شوند، با شناسایی آنتی‌بادی‌های خاصی که در پاسخ به عفونت بروسلا تولید می‌شوند، به تشخیص بروسلوز کمک می‌کنند. هر روش مزایای خود را دارد و ممکن است بسته به زمینه بالینی و قابلیت های آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گیرد. نتیجه مثبت تست سرولوژیکی، همراه با یافته های بالینی، می تواند به شدت از تشخیص بروسلوز حمایت کند.

روش کشت میکروبیولوژیک:

کشت یک روش تشخیصی کلاسیک و قطعی برای تشخیص تب مالت (بروسلوز) است. این روش شامل جداسازی و کشت باکتری بروسلا از نمونه های بالینی، مانند خون یا سایر مایعات بدن، برای تایید وجود پاتوژن است. از آنجایی که باکتری بروسلا میتواند وارد خون شده و باکتریمی و یا حتی عفونت منتشر در بدن بیمار ایجاد کند، جدا کردن باکتری از خون در مراحل حاد بیماری از طریق این آزمایش میسر است. در اینجا شرح مفصلی از روش کشت میکروبیولوژیکی برای تشخیص تب مالت (بروسلوز) آورده شده است:

مجموعه نمونه:

  • نمونه خون: خون متداول ترین نمونه جمع آوری شده برای کشت میکروبیولوژیک بروسلا است. در حالت ایده آل، چندین نمونه خون باید طی چند روز جمع آوری شود، زیرا بروسلا می تواند به طور متناوب در جریان خون وجود داشته باشد.
  • سایر نمونه ها: علاوه بر خون، نمونه هایی از مغز استخوان، مایع مغزی نخاعی یا سایر مایعات بدن مربوطه ممکن است در صورت مشکوک شدن به گسترش بروسلوز به این محل ها جمع آوری شود.

محیط های کشت:

محیط انتخابی: گونه های بروسلا باکتری های سختگیر هستند که برای رشد به مواد مغذی و شرایط خاصی نیاز دارند. بروسلا آگار یا آگار خون همراه با مواد مغذی خاص معمولاً برای تقویت رشد آنها و در عین حال مهار رشد سایر باکتری ها استفاده می شود.

گونه های بروسلا اغلب از خون و مغز استخوان بازیابی می شوند. در موارد کمتر، آنها از مواد به دست آمده از آبسه طحال و کبد و CSF بازیابی می شوند. این ارگانیسم به آرامی در محیط های آزمایشگاهی استاندارد از جمله بروسلا، خون، شکلات و تریپتیکاز سویا آگار رشد می کند. برخی از جدایه ها روی MacConkey آگار رشد متغیری دارند.

انکوباسیون: محیط ها در دمای کنترل شده (معمولاً در حدود 37 درجه سانتیگراد) با افزایش سطح دی اکسید کربن (CO2) حدود 5 تا 10 درصد انکوبه می شوند تا شرایط درون بدن انسان را تقلید کنند. بروسلا به کندی رشد می کند و ممکن است چند روز تا چند هفته طول بکشد تا قابل مشاهده شود.

تلقیح: بخشی از نمونه پردازش شده بر روی محیط کشت بروسلا تلقیح می شود. برای افزایش شانس تشخیص باکتری ممکن است از محیط های کشت چندگانه استفاده شود.

انکوباسیون و مشاهده: محیط های کشت تلقیح شده در یک دستگاه انکوباتور تخصصی با درجه حرارت و غلظت CO2 مناسب قرار می گیرند. محیط ها  روزانه از نظر رشد کلنی های بروسلا کنترل می شوند. رشد معمولاً به صورت کلونی های کوچک، شفاف و صاف روی آگار ظاهر می شود.

تشخیص:

  • ویژگی های کلنی: ویژگی های کلنی، مانند اندازه، مورفولوژی و رنگ، ذکر شده است. در حالی که این ویژگی ها حاکی از وجود بروسلا هستند، تست های تکمیلی بیشتری لازم است.
  • تست های بیوشیمیایی: تست های تاییدی، از جمله آزمایش های مختلف بیوشیمیایی (به عنوان مثال، تست اوره آز، تست اکسیداز، و تولید H2S)، برای شناسایی گونه های بروسلا انجام می شود.

تست حساسیت آنتی بیوتیکی: آزمایش حساسیت آنتی بیوتیکی ممکن است برای تعیین موثرترین آنتی بیوتیک ها برای درمان انجام شود.

گزارش نویسی:

  • نتیجه مثبت: نتیجه کشت مثبت، همراه با شناسایی گونه، به ارائه دهنده مراقبت های بهداشتی گزارش می شود.
  • نتیجه منفی: اگر پس از یک دوره کمون مناسب رشدی مشاهده نشد، نتیجه کشت منفی گزارش می شود.
روش کشت برای تشخیص تب مالت (بروسلوز)

روش کشت برای تشخیص تب مالت (بروسلوز)

توجه: بروسلا یک عامل بسیار عفونی است و پرسنل آزمایشگاه باید اقدامات احتیاطی شدید ایمنی از جمله استفاده از کابینت های ایمنی زیستی و تجهیزات حفاظت فردی را در طول پردازش و کشت نمونه رعایت کنند.

انواع کلنی در محیط های کشت باکتری بروسلا و تفاوت های آن:

هنگام کشت گونه های بروسلا، ممکن است انواع کلنی های مختلف را مشاهده کنید که هر کدام دارای ویژگی های متمایزی هستند. در اینجا چند نوع کلنی رایج در کشت های باکتریایی بروسلا و تفاوت های آنها آورده شده است:

کلنی های صاف (S):
– شکل ظاهری: کلنی های صاف معمولا گرد، محدب هستند و ظاهری براق یا مخاطی از خود نشان می دهند.
– خصوصیات: این کلنی ها دارای لبه مشخص و بافتی یکنواخت هستند. آنها اغلب مرطوب به نظر می رسند.
– بیماریزایی: کلنی های صاف با سویه های بیماریزای بروسلا همراه هستند. آنها یک ساختار لیپوپلی ساکارید کامل (LPS) تولید می کنند و می توانند باعث بیماری در حیوانات و انسان شوند.

کلنی های صاف Sکلنی های ناهموار (R):
– شکل ظاهری: کلنی های خشن در مقایسه با کلنی های صاف دارای بافت خشک، چروکیده و خشن هستند.
– خصوصیات: فاقد ساختار کامل LPS بوده.
– بیماریزایی: کلنی های خشن اغلب با سویه های بروسلا ضعیف شده یا کم خطرتر همراه هستند. آنها ممکن است باعث بیماری یا عفونت های خفیف تری نشوند.

کلنی های میانی:
– ظاهر: کلنی های میانی ویژگی هایی را از خود نشان می دهند که بین کلنی های صاف و خشن است. آنها ممکن است تا حدودی صاف تر از کلنی های خشن به نظر برسند اما ظاهر براق کلنی های صاف را ندارند.
– ویژگی ها: کلنی های میانی می توانند انواعی را بین سویه های کاملاً بیماری زا و ضعیف نشان دهند.
– بیماریزایی: حدت سویه های بروسلا با کلنی های میانی بسته به سویه خاص و وجود فاکتورهای حدت می تواند متفاوت باشد.

روش های مولکولی:

آزمایش‌های مولکولی، به‌ویژه آزمایش‌های واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR)، به دلیل حساسیت و ویژگی بالا به ابزاری ارزشمند در تشخیص تب مالت (بروسلوز) تبدیل شده‌اند. PCR امکان تشخیص مستقیم DNA بروسلا در نمونه های بالینی را فراهم می کند و نتایج سریع و دقیقی را ارائه می دهد. در اینجا شرح مفصلی از روش PCR برای تشخیص تب مالت (بروسلوز) آورده شده است:

  • مجموعه نمونه: نمونه های بالینی، مانند خون، مایع مغزی نخاعی، مغز استخوان، یا نمونه های بافتی از اندام های آسیب دیده، از بیمار جمع آوری می شود.
  • استخراج DNA: نمونه های جمع آوری شده در آزمایشگاه برای آزادسازی و خالص سازی DNA پردازش می شوند. این ممکن است شامل تخریب سلول ها و اختلال در غشای سلولی برای دسترسی به مواد ژنتیکی باشد. DNA از نمونه های پردازش شده با استفاده از کیت ها یا روش های تخصصی استخراج می شود. این مرحله برای به دست آوردن DNA با کیفیت بالا برای PCR بسیار مهم است.
  • طراحی پرایمر: پرایمرهای خاص برای هدف قرار دادن مناطقی از ژنوم بروسلا که منحصر به جنس یا گونه خاص هستند طراحی شده اند. ممکن است چندین مجموعه پرایمر برای افزایش حساسیت استفاده شود.
  • اجزای واکنش: مخلوط های واکنش PCR، از جمله الگوی DNA استخراج شده از نمونه بالینی، پرایمرها، آنزیم DNA پلیمراز، نوکلئوتیدها (A، T، C و G) و محلول بافر تهیه می شوند. کنترل های مثبت و منفی در هر اجرای PCR گنجانده شده است.
  • چرخه حرارتی: مخلوط واکنش PCR تحت یک سری چرخه حرارتی در دستگاه PCR قرار می گیرد. هر چرخه معمولاً شامل سه مرحله است: دناتوراسیون، بازپخت و گسترش.
  1. دناتوره شدن: واکنش تا دمای بالا (حدود 94 تا 98 درجه سانتیگراد) گرم می شود و باعث جدا شدن رشته های DNA (دناتوره) می شود.
  2. بازپخت: واکنش تا دمای پایین تری (معمولاً 50 تا 60 درجه سانتیگراد) خنک می شود و به پرایمرها اجازه می دهد به طور خاص به توالی های مکمل خود روی DNA هدف متصل شوند.
  3. گسترش: دما کمی افزایش می یابد (معمولاً حدود 72 درجه سانتیگراد) و آنزیم DNA پلیمراز رشته های جدید DNA را با گسترش از آغازگرها سنتز می کند.
  • سیکل های تقویت: فرآیند ترمال سیکلینگ 20 تا 40 بار تکرار می شود. با هر چرخه، توالی DNA هدف به صورت تصاعدی تقویت می شود.
  • تشخیص: پس از تقویت PCR، بخش کوچکی از مخلوط واکنش با استفاده از الکتروفورز ژل آنالیز می شود. این تکنیک قطعات DNA را بر اساس اندازه روی ژل آگارز جدا می کند.
  • تجسم: ژل با یک رنگ اتصال به DNA رنگ می شود که تحت نور ماوراء بنفش (UV) فلورسانس می شود. اگر DNA بروسلا در نمونه وجود داشته باشد، نوارهای DNA با اندازه خاص روی ژل تولید می کند.
  • تفسیر:
  1. نتیجه مثبت: نتیجه مثبت PCR با وجود نوارهای DNA با اندازه مورد انتظار روی ژل نشان داده می شود. وجود این باندها وجود DNA بروسلا را در نمونه بالینی تایید می کند.
  2. نتیجه منفی: یک نتیجه منفی با عدم وجود نوارهای DNA با اندازه مورد انتظار نشان داده می شود. با این حال، یک نتیجه منفی به طور کامل بروسلوز را رد نمی کند و ممکن است ارتباط بالینی با سایر روش های تشخیصی ضروری باشد.
روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای تشخیص بیماری سفلیس

روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای تشخیص بیماری تب مالت (بروسلوز)

PCR یک ابزار تشخیصی قدرتمند و اختصاصی برای تشخیص DNA بروسلا در نمونه های بالینی است. سرعت و دقت آن، آن را به یکس از آزمایش‌های تشخیصی تب مالت (بروسلوز)، به‌ویژه زمانی که نیاز به تأیید سریع است یا زمانی که آزمایش‌های سرولوژیکی نتایج غیرقابل‌قطعی دارند، به عنوان مکمل ارزشمندی تبدیل کرده است.

چه چیزی در آزمایش تب مالت (بروسلوز) مورد بررسی قرار می گیرد؟

ساختار باکتری بروسلا:

باکتری بروسلا، کوکوباسیل های گرم منفی کوچکی هستند که 0/5 تا 0/7 میکرومتر در 0/6 تا 1/5 میکرومتر اندازه دارند. در اسمیر، آنها عمدتاً به صورت تک کوکوباسیلی ظاهر می شوند، اما ممکن است به صورت جفت یا زنجیره کوتاه ایجاد شوند. آنها موجودات غیر متحرک، کاملاً هوازی، کاتالاز و اکسیداز مثبت هستند. آنها غیر تخمیرکننده هستند. آنها می توانند در محیط های مختلف آزمایشگاهی رشد کنند، اما رشد اغلب با حضور 5 تا 10 درصد CO2 و افزودن خون یا سرم افزایش می یابد.

ساختار باکتری بروسلاساختار آنتی ژنی بروسلا دارای لیپوپلی ساکاریدها (LPS) است که نقش مهمی در بیماریزایی آن دارند. ژنوم آن از دو کروموزوم دایره ای تشکیل شده است که ثبات ژنتیکی قابل توجهی دارند. تنوع آنتی ژنی در بروسلا در درجه اول در پروتئین های غشای خارجی رخ می دهد.

موجودات بروسلا به صورت درون سلولی در نوتروفیل ها و ماکروفاژها قرار دارند. آنها دارای انواع فاکتورهای بیماریزا هستند که از کشتار توسط فاگوسیت ها جلوگیری می کنند و بقا را افزایش می دهند. لنفادنوپاتی موضعی اغلب با انتشار از طریق سیستم رتیکولواندوتلیال و تشکیل گرانولوم در اندام های مختلف از جمله کبد، طحال، مغز استخوان، دستگاه ادراری تناسلی و ریه ها رخ می دهد. بروسلا به عنوان عوامل بیوتروریسم رده B شناخته می شوند.

تایپ های مختلف بروسلا:

بروسلا گروهی از باکتری های گرم منفی است که شامل چندین گونه است که هر کدام با حیوانات میزبان خاصی سازگار شده اند. این گونه های مختلف بروسلا و میزبان های اولیه آنها به شرح زیر است:

بروسلا ملیتنسیس (melitensis):
– میزبان: بز و گوسفند.
– اهمیت: برای انسان خطرناک ترین است و باعث بروسلوز شدید می شود.

بروسلا آبورتوس (abortus):
– میزبان: گاو، گاو گاومیش و سایر حیوانات گاو.
– اهمیت: باعث سقط مسری در گاو می شود.

بروسلا suis:
– میزبان: خوک ها میزبان اولیه هستند، اما می توانند حیوانات دیگر از جمله جوندگان را نیز آلوده کنند.
–  اهمیت: مرتبط با بروسلوز خوکی، که می تواند انسان را تحت تاثیر قرار دهد.

بروسلا کانیس (canis):
– میزبان: سگ ها.
– اهمیت: باعث ایجاد بروسلوز در سگ ها می شود و از طریق تماس با حیوانات آلوده به انسان منتقل می شود.

بروسلا اویس (ovis):
– میزبان: گوسفند و قوچ.
– اهمیت: مسئول بروسلوز گوسفند است که عمدتاً گوسفندان را مبتلا می کند.

بروسلا نئوتوما (neotomae):
– میزبان: درختان جنگلی صحرا.
–  اهمیت: کمتر مورد مطالعه قرار گرفته و عمدتاً جوندگان را تحت تأثیر قرار می دهد.

بروسلا سیتی (ceti):
– میزبان: پستانداران دریایی از جمله دلفین ها و نهنگ ها.
– اهمیت: بروسلوز پستانداران دریایی، با پتانسیل مشترک بین انسان و دام.

این گونه‌های بروسلا با حیوانات خاصی سازگار شده‌اند و عفونت‌ها اغلب توسط میزبان محدود می‌شوند. با این حال، گونه های خاصی مانند B. suis و B. canis و B. melitensis می توانند به انسان منتقل شوند و منجر به عفونت های مشترک بین انسان و دام شوند. هر گونه بروسلا ممکن است تظاهرات بالینی کمی متفاوت در انسان ایجاد کند، با درجات مختلف شدت.

تایپ های مختلف بروسلادرک این گونه‌ها و میزبان‌های آنها برای پیشگیری، کنترل و تشخیص تب مالت (بروسلوز) بسیار مهم است، زیرا به شناسایی منابع عفونت و توسعه مداخلات هدفمند برای محافظت از سلامت حیوانات و انسان کمک می‌کند.

پاتوژنز باکتری بروسلا:

پاتوژنز باکتری بروسلا شامل مجموعه ای از فعل و انفعالات پیچیده بین باکتری و سیستم ایمنی میزبان است که به بروسلا اجازه می دهد تا یک عفونت پایدار ایجاد کند. در اینجا توضیح مفصلی از پاتوژنز بروسلا آورده شده است:

  • ورود و تهاجم: بروسلا در درجه اول از طریق غشاهای مخاطی، راه های تنفسی یا از طریق تماس مستقیم با بافت ها یا مایعات آلوده حیوانی (مثلاً شیر غیر پاستوریزه) وارد بدن میزبان می شود. باکتری همچنین می تواند به غشاهای مخاطی مانند دستگاه گوارش و تنفسی نفوذ کند یا از طریق خراشیدگی پوست و سطوح مخاطی وارد شود.
  • بقای درون سلولی: وقتی بروسلا وارد میزبان می شود، توانایی قابل توجهی برای زنده ماندن و تکثیر در سلول های میزبان، در درجه اول ماکروفاژها، دارد. باکتری‌ها از یک سیستم ترشح تخصصی نوع IV (T4SS) برای تزریق پروتئین‌های مؤثر به سلول‌های میزبان استفاده می‌کنند و فرآیندهای سلولی را تعدیل می‌کنند تا یک واکوئل درون سلولی مطلوب ایجاد کنند.
  • فرار از پاسخ ایمنی: بروسلا مکانیسم هایی را برای فرار از سیستم ایمنی میزبان ایجاد کرده است، از جمله جلوگیری از فعال شدن سلول های ایمنی.  از همجوشی فاگوزوم ها (بخش های درون سلولی حاوی باکتری) با لیزوزوم ها که در آن پاتوژن ها معمولاً از بین می روند، جلوگیری می کند. بروسلا همچنین از تولید سیتوکین های پیش التهابی جلوگیری می کند و پاسخ ایمنی را کاهش می دهد.
  • عفونت مزمن: بروسلا می تواند برای مدت طولانی در سلول های میزبان باقی بماند و منجر به عفونت مزمن شود. این ماندگاری به توانایی آن در تشکیل ساختارهای محافظ به نام واکوئل های حاوی بروسلا (BCVs) نسبت داده می شود که از تشخیص و تخریب توسط سیستم ایمنی میزبان جلوگیری می کند.
  • انتقال از سلول به سلول: بروسلا می تواند از یک سلول میزبان به سلول دیگر بدون قرار گرفتن در معرض محیط خارج سلولی حرکت کند. این گسترش سلول به سلول، باکتری ها را قادر می سازد تا از نظارت ایمنی فرار کنند.
  • انتشار سیستمی: با گذشت زمان، بروسلا می تواند از محل اولیه عفونت به اندام ها و بافت های مختلف در سراسر بدن، از جمله کبد، طحال، مغز استخوان و اندام های تولید مثلی گسترش یابد. این انتشار مسئول طیف وسیعی از تظاهرات بالینی مشاهده شده در تب مالت (بروسلوز) است.
  • تظاهرات بالینی: در انسان، تب مالت (بروسلوز) می تواند منجر به علائم بالینی مختلفی از جمله تب موج دار، درد مفاصل، خستگی و عوارض خاص اندام مانند هپاتواسپلنومگالی (بزرگ شدن کبد و طحال) شود. شدت و تظاهرات بالینی بروسلوز می تواند بسته به گونه بروسلا درگیر و پاسخ ایمنی میزبان متفاوت باشد.

پاتوژنز باکتری بروسلاعلائم بیماری تب مالت (بروسلوز):

علائم و نشانه‌ها اغلب متغیر و غیراختصاصی هستند و تب، لرز، تعریق و بی‌اشتهایی اغلب رخ می‌دهند. تب مشخصاً روزانه یا موجی است و ممکن است با تب مالاریا یا حصبه اشتباه گرفته شود. دوره کمون معمولاً 1 تا 4 هفته در نظر گرفته می شود. اوره آز که توسط بیشتر گونه‌های بروسلا تولید می‌شود، به‌عنوان یک عامل بیماری‌زای مهم عمل می‌کند که امکان عبور از محیط اسیدی معده را در زمانی که عفونت از طریق بلع اتفاق می‌افتد را ممکن می‌سازد.

تب مالت (بروسلوز)، بیماری مشخصه ناشی از بروسلا، در انسان و حیوان به طور متفاوتی ظاهر می شود:

در انسان:

– تب موج دار: با تب متناوب، تعریق و لرز مشخص می شود.
– آرتریت: التهاب مفاصل.
– علائم عصبی: از جمله سردرد، افسردگی و خستگی.
– هپاتیت: التهاب کبد.
– اندوکاردیت: عفونت دریچه های قلب.

علائم بیماری تب مالت (بروسلوز) در حیوانات:

– سقط جنین: یک ویژگی مشترک به ویژه در گاو.
– ناباروری: عملکرد باروری را مختل می کند.
– اورکیت: التهاب بیضه.
– آفت های مفصلی: عفونت مفاصل و استخوان.

علائم بیماری تب مالت (بروسلوز) در حیوانات واکوئل های حاوی بروسلا امکان فرار از سیستم ایمنی میزبان را فراهم می کند و یک محیط اسیدی برای جلوگیری از کشتن آنتی بیوتیک فراهم می کند. عوارض عفونت بروسلوز شامل سپتی سمی و استئومیلیت و به ندرت ارکیت، سالپنژیت و تظاهرات قلبی و عصبی بیماری است.

بروسلا باکتری های داخل سلولی هستند که طیف وسیعی از حیوانات را آلوده می کنند و می توانند باعث عفونت در انسان شوند. آنها پاتوژن‌های مهم دامپزشکی هستند و بیشتر عفونت‌های انسانی در افراد دارای خطرات شغلی مانند دامپزشکان و کارگران لبنیات و کشتارگاه‌ها دیده می‌شود.

انتقال باکتری بروسلا:

رایج ترین راه ابتلا به تب مالت (بروسلوز) خوردن یا نوشیدن لبنیات غیرپاستوریزه/خام است. هنگامی که گوسفند، بز، گاو یا شتر آلوده می شوند، شیر آنها به باکتری آلوده می شود.اگر شیر دام های آلوده پاستوریزه نشود، عفونت به افرادی که شیر و/یا فرآورده های پنیر مصرف می کنند منتقل می شود.

تنفس باکتری هایی که باعث تب مالت (بروسلوز) می شوند نیز ممکن است منجر به عفونت شود. این خطر به طور کلی برای افرادی که در آزمایشگاه هایی که با باکتری کار می کنند بیشتر است. علاوه بر این، کارمندان کشتارگاه و بسته بندی گوشت نیز در معرض این باکتری قرار گرفته و در نهایت آلوده می شوند.

باکتری ها همچنین می توانند از طریق تماس با حیوانات آلوده وارد زخم ها در پوست / غشاهای مخاطی شوند. این مسئله برای کارگرانی که تماس نزدیک با حیوانات یا فضولات حیوانی دارند (حیوانات تازه متولد شده، جنین ها و مواد زائدی که ممکن است از بدو تولد ایجاد شود) ایجاد می کند. چنین کارگرانی ممکن است شامل موارد زیر باشند:

  • کارگران کشتارگاه
  • کارکنان کارخانه بسته بندی گوشت
  • دامپزشکان
  • افرادی که حیوانات را شکار می کنند نیز ممکن است در معرض خطر باشند.

انتقال باکتری بروسلاانتقال تب مالت (بروسلوز) از فرد به فرد بسیار نادر است. مادران مبتلا که در دوران شیردهی هستند ممکن است عفونت را به نوزاد خود منتقل کنند. انتقال جنسی به ندرت گزارش شده است. در حالی که غیر معمول است، انتقال ممکن است از طریق پیوند بافت یا انتقال خون نیز رخ دهد.

پیشگیری از تب مالت (بروسلوز):

پیشگیری از تب مالت (بروسلوز) نیازمند رویکردی چند جانبه است:

  • واکسیناسیون: واکسن های موثر برای دام وجود دارد که باعث کاهش انتقال به انسان می شود.
  • روش های بهداشتی: برخورد صحیح با فرآورده های حیوانی از جمله پاستوریزه کردن شیر.
  • قرنطینه: جداسازی و آزمایش حیوانات وارداتی.
  • حفاظت شخصی: استفاده از دستکش و ماسک هنگام کار با حیوانات.
  • افزایش آگاهی: در کشورهایی که ریشه‌کنی در حیوانات از طریق واکسیناسیون یا حذف حیوانات آلوده امکان‌پذیر نیست، پیشگیری از عفونت انسان اساساً مبتنی بر افزایش آگاهی، اقدامات ایمنی غذایی، بهداشت شغلی و ایمنی آزمایشگاهی است.

درمان تب مالت (بروسلوز):

آنتی بیوتیک های متعددی علیه گونه های بروسلا موثر هستند، از جمله داکسی سیکلین، آمینوگلیکوزیدها، ریفامپین، TMP-SMX، برخی فلوروکینولون ها و سفالوسپورین ها. ترکیب با درمان دوگانه یا سه گانه توصیه می شود زیرا مطالعات نشان داده اند که در صورت استفاده از مونوتراپی، شکست و عود بیشتری در درمان وجود دارد.

برای موارد بدون عارضه، WHO درمان با داکسی سایکلین و ریفامپین را برای 6 تا 8 هفته توصیه می کند. دوره های درمانی طولانی تری برای موارد نوروبروسلوز و بیماران مبتلا به اندوکاردیت توصیه می شود. اگرچه شکست های درمانی رخ می دهد، اما تصور نمی شود که به دلیل مقاومت ضد میکروبی باشد.

سوالات متداول

اپیدمیولوژی و تاریخچه تب مالت (بروسلوز) در ایران چگونه است؟

بروسلا و تب مالت از بیماری‌های اهمی هستند که در ایران و دیگر نقاط جهان با آن مواجهیم. در اوائل قرن بیستم، بروسلا و تب مالت به عنوان دو عامل مسئول بروز اختلالات زیستی در انسان و دام‌ها شناخته شدند.

در سال ۱۳۱۰ ویروس تب مالت به وسیله انستیتو پاستور تأیید شد و در سال ۱۳۲۳ بروسلا آبورتوس توسط دکتر کاوه در مؤسسه رازی از گاوداری‌های اطراف شهر تهران جدا گردید. این کشف‌ها به شناخت یکی از عوامل سقط جنین گاوها در تهران منجر شد.

دکتر انتصار در سال ۱۳۲۷ اولین مورد بروسلا ملی‌تنسیس را گزارش داد. در سال ۱۳۳۷ دکتر تاج‌بخش و گاتل (دانشجوی فرانسوی) آزمایش تثبیت کمپلمان و سروآگلوتیناسیون را بر روی نمونه سرم از حیوانات مختلف به‌عنوان تکنیک‌های تشخیصی برای تب مالت مورد استفاده قرار دادند.

تب مالت در تمام نقاط کشور پراکنده وجود دارد، اما وفور آن در مناطق مختلف متفاوت است. تحقیقات نشان داده است که بین میانگین بروز گزارش‌شده سالیانه تب مالت در هر استان و تراکم جمعیت گوسفند و بز، رابطه آماری مستقیم وجود دارد. این به معنایی است که در استان‌های دارای تراکم جمعیت بیشتر این دام‌ها، بروز تب مالت بیشتر است.

در ایران برای کنترل تب مالت در دام‌ها از واکسن‌های S19 (تا سال ۱۳۸۳) و RB51 (از سال ۱۳۸۲) برای گوساله و گاو استفاده می‌شود. همچنین برای بره، بزغاله، گوسفند و بز از واکسن Rev1 استفاده می‌شود. این واکسن‌ها به صورت فراگیر و رایگان توسط سازمان دامپزشکی در سراسر کشور توزیع و تزریق می‌شوند.

همچنین برنامه‌های کشتار دام‌ها به صورت منظم اجرا می‌شود. به کلی، برای کنترل تب مالت و بروسلا در ایران، باید به واکسیناسیون دام‌ها توجه داشته و از مصرف لبنیات پاستوریزه تأیید شده استفاده کرد.

عوارض بالقوه تب مالت (بروسلوز) درمان نشده در انسان چیست؟

تب مالت (بروسلوز) درمان نشده می تواند منجر به چندین عارضه بالقوه در انسان شود، از جمله:

  • عفونت مزمن: باکتری بروسلا می تواند برای مدت طولانی در بدن باقی بماند و منجر به بروسلوز مزمن شود که می تواند باعث عود علائم شود.
  • درگیری اندام ها: باکتری ها می توانند اندام های مختلف از جمله کبد، طحال، استخوان ها و مفاصل را تحت تاثیر قرار دهند و به طور بالقوه باعث آسیب اندام شوند.
  • عوارض عصبی: تب مالت (بروسلوز) می تواند منجر به علائم عصبی مانند سردرد، افسردگی و حتی تشنج شود.
  • عوارض قلبی عروقی: به ندرت تب مالت (بروسلوز) می تواند منجر به اندوکاردیت، عفونت دریچه های قلب شود.
  • مشکلات باروری: می تواند بر سلامت باروری تأثیر بگذارد و منجر به ناباروری و عوارض دوران بارداری شود.
  • عوارض استئوآرتیکولار: درد مفاصل، آرتریت و اسپوندیلیت از عوارض شایع هستند.
  • خستگی و ضعف: خستگی و ضعف مزمن می تواند برای مدت طولانی باقی بماند.

آیا واکسن برای پیشگیری از تب مالت (بروسلوز) در انسان وجود دارد؟

در حال حاضر هیچ واکسنی در دسترس تجاری برای پیشگیری از تب مالت (بروسلوز) در انسان وجود ندارد. تلاش‌های تحقیق و توسعه بر روی واکسن‌هایی برای دام و حیوانات متمرکز شده است که به طور غیرمستقیم خطر ابتلا به عفونت انسانی را کاهش می‌دهد.

چه واکسن هایی برای پیشگیری از تب مالت (بروسلوز) در دام استفاده می شود؟

واکسن هایی که برای پیشگیری از تب مالت (بروسلوز) در دام استفاده می شوند عبارتند از سویه زنده ضعیف شده بروسلا آبورتوس 19 (واکسن S19) برای گاو و سویه زنده ضعیف شده بروسلا ملیتنسیس Rev.1 (واکسن Rev.1) برای بز و گوسفند.

واکسن RB51 یکی دیگر از واکسن های ضعیف شده زنده است که برای جلوگیری از تب مالت (بروسلوز) در گاوها، عمدتاً در ایالات متحده استفاده می شود. همچنین بروسلا آبورتوس را هدف قرار می دهد.

واکسیناسیون تب مالت (بروسلوز) در دامآیا تب مالت از طریق جنسی در انسان منتقل می شود؟

این بیماری عمدتاً از طریق تماس مستقیم با حیوانات آلوده یا محصولات آنها، مصرف محصولات حیوانی آلوده (مانند شیر و پنیر غیرپاستوریزه)، استنشاق ذرات معلق در هوا از حیوانات آلوده یا از طریق شکستگی در پوست یا غشاهای مخاطی هنگام دست زدن به بافت‌ها یا مایعات آلوده منتقل می‌شود. . انتقال جنسی تب مالت (بروسلوز) بسیار نادر است و به عنوان یک راه انتقال قابل توجه در نظر گرفته نمی شود. راه های اصلی انتقال مربوط به تماس با حیوانات آلوده یا محصولات جانبی آنها است.

1عوارض بالقوه تب مالت (بروسلوز) در زنان باردار چیست؟

زنان باردار مبتلا به تب مالت (بروسلوز) ممکن است با عوارض دیگری از جمله:

– سقط جنین: تب مالت (بروسلوز) می تواند خطر سقط جنین را افزایش دهد.
– تولد زودرس: ممکن است منجر به زایمان زودرس شود.
– عفونت جنین: بروسلا می تواند از مادر به جنین منتقل شود و باعث تب مالت مادرزادی شود.

آیا تب مالت از مادر به جنین در انسان منتقل می شود؟

بله، تب مالت (بروسلوز) می تواند از مادر باردار به جنین او منتقل شود. این انتقال از مادر به جنین به عنوان تب مالت مادرزادی شناخته می شود. زمانی رخ می دهد که باکتری بروسلا از سد جفت عبور کرده و جنین در حال رشد را در دوران بارداری آلوده کند. تب مالت مادرزادی یک بیماری نادر اما جدی است که می تواند منجر به مشکلات سلامتی مختلف در نوزاد شود، از جمله تب، درگیری اندام ها و سایر عوارض. زنان باردار مبتلا به بروسلوز باید مراقبت های پزشکی و درمان فوری را دریافت کنند تا خطر انتقال عفونت به فرزند متولد نشده خود را کاهش دهند.

چگونه تب مالت (بروسلوز) حاد و مزمن را در انسان تشخیص می دهند؟

تشخیص تب مالت (بروسلوز) حاد و مزمن در انسان معمولا شامل موارد زیر است:

– ارزیابی بالینی: ارزیابی علائم، سابقه پزشکی و قرار گرفتن در معرض احتمالی با حیوانات یا محصولات آلوده.
– آزمایش های سرولوژیکی: آزمایش های خون مانند رز بنگال، رایت، کومبس رایت، تست 2-مرکاپتواتانول (2ME)، تست تثبیت مکمل (CFT) و سنجش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) برای تشخیص آنتی بادی ها استفاده می شود.
– کشت:جداسازی باکتری بروسلا از نمونه های بالینی.
– تست های مولکولی: واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) برای تشخیص DNA بروسلا.
– تصویربرداری: اشعه ایکس یا سایر تکنیک های تصویربرداری برای ارزیابی درگیری اندام.

آیا باکتری بروسلا می تواند در محیط خارج از سلول های میزبان زنده بماند؟

باکتری بروسلا در خارج از سلول میزبان بقای محدودی دارد. آنها به شدت با بقای درون سلولی سازگار هستند و می توانند برای مدت طولانی در سلول های میزبان باقی بمانند. با این حال، آنها در برابر شرایط محیطی، مانند دما و اشعه UV آسیب پذیر هستند. در خارج از میزبان، بقای آنها عموماً کوتاه مدت است.

گونه های بروسلا از نظر ترکیب ژنتیکی چه تفاوت هایی دارند؟

گونه های مختلف بروسلا ترکیبات ژنتیکی مشخصی دارند. این تفاوت های ژنتیکی بر ویژگی میزبان، حدت و تظاهرات بالینی آنها تأثیر می گذارد. به عنوان مثال، بروسلا ملیتنسیس با بز و گوسفند سازگار است، در حالی که بروسلا آبورتوس عمدتاً گاو را تحت تأثیر قرار می دهد.

نقش لیپوپلی ساکاریدها (LPS) در حدت تب مالت (بروسلوز) چیست؟

لیپوپلی ساکاریدها (LPS) اجزای حیاتی دیواره سلولی بروسلا هستند و نقش مهمی در شدت بروسلوز دارند. LPS می تواند پاسخ ایمنی را در میزبان ایجاد کند و منجر به التهاب و علائم بالینی تب مالت (بروسلوز) شود. ساختار و ترکیب LPS می‌تواند در بین گونه‌های بروسلا متفاوت باشد و به تفاوت‌ها در بیماری‌زایی و ارائه بیماری کمک کند.

نقش لیپوپلی ساکاریدها (LPS) در حدت تب مالت (بروسلوز)

عوارض دراز مدت تب مالت (بروسلوز) برای سلامتی انسان چیست؟

اثرات طولانی مدت تب مالت (بروسلوز) بر سلامت انسان شامل سندرم خستگی مزمن، افسردگی، اضطراب، درد مفاصل، درد عضلانی و علائم عصبی مانند از دست دادن حافظه و مشکل در تمرکز است.

آیا تب مالت (بروسلوز) از طریق حشرات ناقل قابل انتقال است؟

تب مالت (بروسلوز) در درجه اول از طریق تماس مستقیم با حیوانات آلوده یا مصرف محصولات حیوانی آلوده منتقل می شود. حشرات ناقل مانند پشه ها یا کنه ها ناقل مهمی برای انتقال بروسلا در انسان نیستند. راه اصلی انتقال از طریق تماس با حیوانات آلوده یا ترشحات/دفع آنهاست.

در سایت World Health Organization (WHO) در مورد تب مالت (بروسلوز) بیشتر بخوانید:

تب مالت (بروسلوز) یک بیماری باکتریایی است که توسط گونه های مختلف بروسلا ایجاد می شود که عمدتا گاو، خوک، بز، گوسفند و سگ را مبتلا می کند. انسان ها معمولاً از طریق تماس مستقیم با حیوانات آلوده، خوردن یا نوشیدن محصولات حیوانی آلوده یا استنشاق عوامل موجود در هوا به این بیماری مبتلا می شوند. بیشتر موارد ناشی از مصرف شیر یا پنیر غیر پاستوریزه از بز یا گوسفند آلوده است.

تب مالت (بروسلوز) یکی از شایع ترین بیماری های مشترک بین انسان و دام است که توسط حیوانات منتقل می شود و در مناطق آندمیک، تب مالت (بروسلوز) انسانی پیامدهای جدی برای سلامت عمومی دارد. گسترش صنایع دامی و شهرنشینی و فقدان اقدامات بهداشتی در دامپروری و حمل و نقل مواد غذایی، تا حدی عامل بیماری تب مالت است که همچنان یک خطر برای سلامت عمومی است.

مطالب مرتبط در متااورگانون:

مورد تایید و بازبینی شده توسط:

دکتر فرزاد باباخانی
دکتر فرزاد باباخانی

این مقاله را به دوستان خود معرفی کنید